La culture in vitro des orchidées
Faire pousser une orchidée in vitro exige des conditions rigoureusement stériles. Parmi les quelque 30 000 espèces d'orchidées recensées dans le monde, certaines prospèrent en serre, d'autres dans nos intérieurs ou en pleine forêt. La méthode in vitro consiste à cultiver la plante dans un récipient en verre hermétiquement fermé. Les graines d'orchidées, extrêmement fines et dépourvues de réserves nutritives, doivent germer dans un milieu stérile contenu dans un bocal ou un flacon : l'enracinement peut prendre jusqu'à trois mois. Une fois arrivées à maturité, les plantules tolèrent bien le rempotage en pot.
Matériel nécessaire
- Poudre de milieu de germination
- Bouteille d'un litre
- Sucre
- Charbon activé
- Eau distillée
- Agitateur magnétique
- Papier pH ou pH-mètre
- Acide chlorhydrique (HCl)
- Hydroxyde de sodium (NaOH)
- Bocal stérile ou boîte de Petri
- Papier aluminium
- Autoclave
- Solution d'eau de Javel à 1 %
- Détergent
- Petits bols
- Seringue de 5 ml
- Chiffon propre
- Graines d'orchidée
- Flacon
- Lampe fluorescente
- Pot de fleurs avec soucoupe
- Terreau
- Eau
- Fongicide
Instructions pas à pas
1. Préparer le milieu de germination
Respectez les quantités indiquées sur l'emballage de la poudre de milieu de germination pour le volume souhaité. Versez la poudre dans une bouteille d'un litre, ajoutez la quantité appropriée de sucre ainsi que 2 grammes de charbon activé par litre, puis complétez avec de l'eau distillée conformément aux instructions. Mélangez à l'aide d'un agitateur magnétique jusqu'à dissolution complète.
2. Ajuster le pH
Mesurez le pH à l'aide de papier indicateur ou d'un pH-mètre et ajustez-le jusqu'à obtenir 5,6 : ajoutez de l'acide chlorhydrique (HCl) pour l'abaisser ou de l'hydroxyde de sodium (NaOH) pour l'élever. Remuez, puis contrôlez à nouveau.
3. Stériliser le milieu
Répartissez le milieu de germination dans des bocaux stériles ou des boîtes de Petri et laissez l'agitateur magnétique dans la bouteille. Posez les couvercles sans les serrer et recouvrez le tout de papier aluminium. Placez les contenants dans un autoclave réglé à environ 120 °C sous une pression de 15 psi pendant 20 minutes. Sortez-les ensuite et laissez refroidir le milieu.
4. Désinfecter les graines
Dans un petit bol propre, préparez une solution d'eau de Javel à 1 % additionnée d'une goutte de détergent. Recouvrez l'embout d'une seringue avec un chiffon stérile, retirez le piston et versez-y quelques graines d'orchidée. Remettez le piston en place et aspirez 4 ml de la solution. Agitez la seringue pendant cinq minutes, videz-la, puis aspirez 4 ml de solution fraîche. Agitez encore cinq minutes avant d'expulser le liquide.
5. Rincer les graines
Versez de l'eau distillée stérile dans un bol en verre propre. Aspirez-la dans la seringue pour rincer les graines, puis expulsez l'eau. Répétez l'opération quatre fois.
6. Ensemencer le flacon
Versez le milieu de germination refroidi dans un flacon ou un bocal stérile, déposez les graines désinfectées à sa surface, puis fermez hermétiquement avec un couvercle muni d'un filtre.
7. Assurer la germination
Placez le flacon sous une lampe fluorescente 12 heures par jour, sauf si l'espèce cultivée requiert une obscurité totale. Maintenez la lampe à au moins 60 cm au-dessus des plantes et la pièce à environ 24 °C (75 °F). Conservez les graines en contenant jusqu'à trois mois, le temps que les plantules mûrissent, et inspectez quotidiennement pour repérer tout signe de contamination.
8. Acclimater les plantules
Retirez le couvercle progressivement : desserrez-le d'abord et attendez trois jours, puis entrouvrez-le partiellement. Trois jours plus tard, augmentez légèrement l'ouverture, et continuez de décaler le couvercle tous les trois jours jusqu'à son retrait complet.
9. Rempoter les jeunes plants
Préparez un pot garni de terreau et remplissez une soucoupe d'eau. Sortez les plantules du flacon, séparez délicatement leurs racines et rincez-les. Trempez-les ensuite dans une solution fongicide avant de mettre chaque plantule en pot.
Avec de la patience et une hygiène irréprochable à chaque étape, votre culture in vitro donnera naissance à de jeunes orchidées vigoureuses, prêtes à embellir votre intérieur.
Source : https://jardin.98905.com/plants-flowers-herbs/orchids/1007109856.html